技术交流｜质粒构建求助，插入片段部分缺失

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  今天实验顺利吗 楼主 2023-05-29 23:56:05 北京

  可以比对一下，是不是同基因的不同isoform,中间缺失的片段是一个或几个Exon 可以比对一下，是不是同基因的不同isoform,中间缺失的片段是一个或几个Exon 昨夜风吹

  一个是酵母基因 缺失的挺多的 只有开头和结尾几个氨基酸。另一个只是换sgRNA 结果中间一部分缺失了 包括一些酵母ori 筛选标记等等。 理论上存在可能是对于大肠无意义的基因可能就复制掉了？

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  今天实验顺利吗 楼主 2023-05-29 23:56:41 北京

  一个是酵母基因 缺失的挺多的 只有开头和结尾几个氨基酸。另一个只是换sgRNA 结果中间一部分缺失 一个是酵母基因 缺失的挺多的 只有开头和结尾几个氨基酸。另一个只是换sgRNA 结果中间一部分缺失了 包括一些酵母ori 筛选标记等等。 理论上存在可能是对于大肠无意义的基因可能就复制掉了？ ... 今天实验顺利吗

  这个酵母基因在大肠也没有同源基因的

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  今天实验顺利吗 楼主 2023-05-29 23:59:18 北京

  神奇的是之前一模一样的方法构都能成功，相同的骨架不同的插入基因，另一个质粒是换不同的sgRNA。这次换新的就出现问题，所以肯定某一步出问题了，想找出来解决办法。其实可以不辞辛苦的多菌p一些 肯定有正确的 但是比较好奇有无解决办法

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