RPKM, FPKM, TPM的计算与区别
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TPM可以用于同一物种不同组织间的比较,因为Sum(TMPs)的值总是唯一的。
然而如果要在不同物种之间比较,则需要利用物种间的同源基因,取top 1000 rank 最保守的同源基因,取median expression levels,来计算scaling factor.
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在研究基因表达比较的时候,最终要的事情就是normalization!!!!
可以从两个方面:
1、从总量上,像fpkm,TPM这些,都是试图从这个方面上normalize,不然你认为他们为什么不直接比较 read 数目呢?
2、利用内参基因(一般是表达稳定的),有一些研究,再计算fpkm 或 TPM这些值后,从两个样本中找排名最保守的前1000名,找到一个因子将相对应的基因表达值调到一致,再利用这个因子调其他的基因,这一例就是从内参角度来normalize。