PH1727 即用型GUS染色液 Ready-to-use GUS Staining Solution Phygene

货号 PH1727
 
名称 即用型GUS染色液 / Ready-to-use GUS Staining Solution
 
规格 50mL | 100mL
 
试剂组分
 
Componets 50mL 100mL Storage
X-GlucSolution(50x) 1mL 2×1mL -20℃避光
GUSBuffer 50mL 100mL 4℃避光
 
 
*有效期12个月
 
产品简介 GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶，该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。 β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-GalactosidaseReporterGeneStainingKit)简称为GUS染色液，其染色原理是适宜的反应条件下β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色，多用于转基因植物的GUS基因表达分析，该即用型试剂比常规GUS染色液操作简便。该试剂仅用于科研领域。
 
操作步骤
 
1、配制X-Gluc染色液：取适量的X-GlucSolution(50x)和GUS Buffer，按1：50比例 充分混匀，配制成X-Gluc染色液，如取0.2ml X-GlucSolution(50x) 加入到10ml GUS Buffer中，即配成10ml GUS染色液，该染色液最好现用现配，短期贮存可以4℃保存3天。
 
2、取适量待染叶片等组织加入适量GUS染色液，使GUS染色液完全浸没组织。
 
3、37℃孵育，随着孵育时间的延长，蓝色渐渐出现，当表达量较高时，GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。
 
4、用70%乙醇脱去样本的叶绿素，一般样本浸没于乙醇，至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光学显微镜下观察，白色背景上的蓝色即为GUS表达位点。
 
注意事项
 
1、配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3天。
 
2、X-GlucSolution(50x)应避免反复冻融，否则染色效率会下降。
 
3、由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。 拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗根就可直接染色；烟草和马铃薯这些植物的茎和叶须在染色前切成薄片（1-3mm）；当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞，建议采购常规GUS染色液。
分享自Phygene