分子生物学（原核生物转录过程1）

一.转录起始

1.转录起点

DNA上方为coding strand，下方为模板链

第一个掺入的核苷酸通常为嘌呤：ATP或GTP，因此5'端通常为pppA和pppG。

2.转录起始

起始阶段包括了RNA pol对DNA模板特定位置的识别，结合，DNA双螺旋解旋，以及几个初始磷酸二脂键的形成。

3.σ因子与启动子

·σ因子的作用

σ因子的作用是促进RNA pol与DNA更加紧密的结合（硝酸纤维素滤膜实验）；

温度提高也能促进两者的紧密结合。

·启动子

启动子：RNA pol与DNA结合并开始转录的位点。

σ因子可使RNA pol与启动子结合更加紧密。

启动子结构的确定：

DNA酶足迹法（DNase I footprinting）

DNase能相同间隔地切除DNA链，在RNA酶的包裹下的部分无法被切除，因此可识别到启动子区域

硫酸二甲酯（DMS）法

主要是为了判断出启动子中哪些是紧密结合位点

·原核生物的启动子结构

一致序列仅代表一种概率，完全匹配的序列出现在强启动子中。

上升突变，下降突变：往完全匹配序列方向的突变叫做上升突变，反之。

-35，-10序列和spacer都十分重要

E.coli中的一个启动子

UP元件：UP元件能被RNA pol识别，提升转录效率（30倍），与α亚基的CTD结合。